與傳統(tǒng)小分子藥物不同，生物制品由于起始原材料來(lái)源于微生物或人/動(dòng)物源的細(xì)胞、組織和體液，其制備過(guò)程或制劑中可能添加人或者動(dòng)物來(lái)源的原輔材料，具有潛在的受病毒污染的風(fēng)險(xiǎn)，因此國(guó)內(nèi)外均對(duì)其病毒安全性提出了明確的法規(guī)要求。其中比較常見(jiàn)的生物制品是中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞系(CHO細(xì)胞)。
作為嚙齒類動(dòng)物細(xì)胞，CHO細(xì)胞常表達(dá)內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒樣顆粒，細(xì)胞上清液中可檢測(cè)到103 - 109 個(gè)/mL的逆轉(zhuǎn)錄病毒樣顆粒。這些顆粒的形態(tài)、生化特性和序列與傳染性逆轉(zhuǎn)錄病毒相似，外源性病毒污染可能發(fā)生在CHO細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，各國(guó)的藥物監(jiān)管機(jī)構(gòu)要求，必須通過(guò)臨床前和生產(chǎn)前申報(bào)材料中的病毒去除/滅活來(lái)核實(shí)，以確保注射用臨床試驗(yàn)病人或上市產(chǎn)品不會(huì)發(fā)生病毒污染。生物制品病毒安全性控制對(duì)于保證藥品的安全性和有效性具有重要意義。
██ 國(guó)內(nèi)外病毒安全性法規(guī)/指南
病毒安全的法規(guī)涉及單抗，血液制品，疫苗，基因和細(xì)胞治療等領(lǐng)域, 世界各主要監(jiān)管機(jī)構(gòu)均已陸續(xù)針對(duì)性地制定、 發(fā)布關(guān)于重組生物技術(shù)產(chǎn)品中病毒安全性研究相關(guān)指導(dǎo)原則。
從《中國(guó)藥典》2020年版的新增章節(jié)來(lái)看，國(guó)內(nèi)法規(guī)的要求是走在世界前列，例如首次提出對(duì)基因治療產(chǎn)品病毒安全性的要求。《中國(guó)藥典》2020年版對(duì)病毒安全性提出了更高的要求，如“應(yīng)明確影響病毒清除效果的關(guān)鍵工藝參數(shù)及控制范圍”，需要生產(chǎn)單位對(duì)生產(chǎn)工藝的病毒清除能力有更全面的了解，必要時(shí)需要通過(guò)實(shí)驗(yàn)，來(lái)評(píng)價(jià)工藝中對(duì)病毒清除效果有關(guān)鍵影響的因素，明確關(guān)鍵工藝參數(shù)的操作區(qū)間，特別是針對(duì)病毒清除效果的“最差工藝條件”。
從法規(guī)的沿革來(lái)看，《中國(guó)藥典》2020年版對(duì)病毒清除的要求，正加速與ICH的指導(dǎo)原則相融合。全球不同地區(qū)對(duì)病毒安全的法規(guī)要求，也有明顯的趨同性，這些變革都是在過(guò)往多年生產(chǎn)實(shí)踐經(jīng)驗(yàn)的基礎(chǔ)上，逐步總結(jié)出來(lái)的。
CDE 2005年發(fā)布的《生物組織提取制品和真核細(xì)胞表達(dá)制品的病毒安全性評(píng)價(jià)技術(shù)審評(píng)一般原則》、《中國(guó)藥典》2020年版、《生物制品病毒安全性控制》和ICH Q5A 都有不同的側(cè)重點(diǎn)，在具體執(zhí)行的過(guò)程中，我們建議參照各個(gè)指導(dǎo)文件的最高標(biāo)準(zhǔn)，結(jié)合針對(duì)實(shí)際工藝的風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估，來(lái)開展驗(yàn)證工作。因?yàn)镃DE要求適用ICH原則，并沒(méi)有說(shuō)2005版的原則不再適用。
██ 生物制品病毒的來(lái)源及安全控制
《中國(guó)藥典》2020年版代表了國(guó)內(nèi)病毒安全最先進(jìn)的要求， ICH Q5A是國(guó)際上通用的病毒安全指導(dǎo)原則。國(guó)內(nèi)、ICH和歐美在保證藥品病毒安全性的基本原則是一致，可歸納為以下三條相互聯(lián)系互補(bǔ)的原則：
（1）預(yù)防：篩選和檢測(cè)用于制備產(chǎn)品的細(xì)胞系和其他原材料，確保所有進(jìn)入細(xì)胞培養(yǎng)罐的物質(zhì)：包括細(xì)胞、細(xì)胞培養(yǎng)基和添加成分沒(méi)有病毒污染；
（2）檢測(cè)：在細(xì)胞培養(yǎng)結(jié)束時(shí)進(jìn)行病毒檢測(cè)，保證在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中沒(méi)有任何病毒污染；
（3）清除：純化工藝清除病毒驗(yàn)證，證明純化工藝能清除已知病毒。
██ 不同類型生物制品病毒安全性控制要點(diǎn)
██ 原材料的病毒安全控制
相較于小分子藥物而言，生物制品生產(chǎn)過(guò)程中使用的各種材料來(lái)源復(fù)雜，可能引入外源因子或毒性化學(xué)材料。因此，對(duì)生物制品生產(chǎn)用原材料和輔料進(jìn)行嚴(yán)格的安全質(zhì)量控制，是降低外源因子或有毒雜質(zhì)污染風(fēng)險(xiǎn)、保證生物制品安全有效的必要措施。
██ 工藝過(guò)程的病毒安全控制
██ 不同生物制品病毒清除方法
██ 如何確定選擇合適的病毒清除工藝？
生物制品病毒安全性控制與評(píng)價(jià)是生產(chǎn)中重要的研究?jī)?nèi)容，需要在生產(chǎn)中嚴(yán)格落實(shí)病毒安全性控制策略，通過(guò)來(lái)源控制、過(guò)程檢測(cè)以及病毒清除工藝驗(yàn)證，切實(shí)保障用藥安全。
